SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TEST
Malarija je hemolitička, febrilna bolest koju prenose komarci i koja zarazi preko 200 miliona ljudi i ubije više od milion ljudi godišnje.Uzrokuju ga četiri vrste Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Svi ovi plazmodiji inficiraju i uništavaju ljudske eritrocite, izazivajući zimicu, groznicu, anemiju i splenomegaliju.P. falciparum uzrokuje teže bolesti od drugih plazmodijalnih vrsta i uzrokuje većinu smrti od malarije.P. falciparum i P. vivax su najčešći patogeni, međutim, postoje značajne geografske varijacije u distribuciji vrsta.
Tradicionalno, malarija se dijagnosticira demonstracijom organizama na Giemsa obojenim debelim razmazima periferne krvi, a različite vrste plazmodija se razlikuju po izgledu u inficiranim eritrocitima.Tehnika je sposobna za preciznu i pouzdanu dijagnozu, ali samo kada je izvode vješti mikroskopisti koristeći definisane protokole, što predstavlja velike prepreke za udaljena i siromašna područja svijeta.
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test je razvijen za rješavanje ovih prepreka.Koristi antitijela specifična za P. falciparum Histidin Rich Protein-II (pHRP-II) i P. vivax laktat dehidrogenazu (Pv-LDH) kako bi istovremeno otkrio i razlikovao infekciju sa P. falciparum i P. vivax.Ispitivanje može obaviti neobučeno ili minimalno obučeno osoblje, bez laboratorijske opreme
PRINCIP
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test je hromatografski imunotest sa lateralnim protokom.Komponente za testiranje trake sastoje se od: 1) konjugatnog jastučića boje bordo boje koji sadrži mišje anti-Pv-LDH antitijelo konjugirano s koloidnim zlatom (Pv-LDH-zlatni konjugati) i mišje anti-pHRP-II antitijelo konjugirano s koloidnim zlatom (pHRP-II-zlatne konjugate), 2. test trake sa nitrostaničnim trakama, 2) kontrolni opseg (C band).Pv traka je prethodno obložena drugim mišjim anti-Pv-LDH specifičnim antitelom za detekciju Pv infekcije, Pf traka je prethodno obložena poliklonskim anti-pHRP-II antitelima za detekciju Pf infekcije, a C traka je obložena kozjim antimišjim IgG.
Tokom testa, adekvatna zapremina uzorka krvi se dozira u jažicu za uzorke (S) test kasete, pufer za lizu se dodaje u jažicu pufera (B).Pufer sadrži deterdžent koji lizira crvena krvna zrnca i oslobađa različite antigene, koji migriraju kapilarnim djelovanjem preko trake koja se nalazi u kaseti.Pv-LDH ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate Pv-LDH-zlato.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim anti-Pv-LDH antitelom, formirajući Pv traku bordo boje, što ukazuje na Pv pozitivan rezultat testa.Alternativno, pHRP-II ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate pHRP-II-zlato.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim anti-pHRP-II antitelima, formirajući Pf traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na Pf.Odsustvo bilo kakvih test traka sugerira negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja bi trebala pokazati bordo obojenu traku imunokompleksa konjugata kozjeg anti-mišjeg IgG/mišjeg IgG (anti-Pv-LDH i anti-pHRPII)-zlata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od test traka.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
