SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TEST
Malarija je hemolitička, febrilna bolest koju prenose komarci i koja zarazi preko 200 miliona ljudi i ubije više od milion ljudi godišnje.Uzrokuju ga četiri vrste Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Svi ovi plazmodiji inficiraju i uništavaju ljudske eritrocite, izazivajući zimicu, groznicu, anemiju i splenomegaliju.P. falciparum uzrokuje teže bolesti od drugih plazmodijalnih vrsta i uzrokuje većinu smrti od malarije.P. falciparum i P. vivax su najčešći patogeni, međutim, postoje značajne geografske varijacije u distribuciji vrsta.
Tradicionalno, malarija se dijagnosticira demonstracijom organizama na Giemsa obojenim debelim razmazima periferne krvi, a različite vrste plazmodija se razlikuju po izgledu u inficiranim eritrocitima1.Tehnika je sposobna za preciznu i pouzdanu dijagnozu, ali samo kada je izvode vješti mikroskopisti koristeći definirane protokole2, što predstavlja velike prepreke za udaljena i siromašna područja svijeta.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit je razvijen za rješavanje ovih prepreka.Test koristi par monoklonskih i poliklonskih antitijela na specifični protein P. falciparum, histidin Repeat Protein II (pHRP-II) i par monoklonskih antitijela na plazmodijum laktat dehidrogenazu (pLDH), protein koji proizvode četiri vrste plazmodijuma i na taj način omogućava otkrivanje bilo koje vrste plazmodijuma i različitih infekcija i simultane infekcije. od ostala tri plazmodija.Može ga izvoditi neobučeno ili minimalno obučeno osoblje, bez laboratorijske opreme.
PRINCIP
Pf/ Pan Malaria Rapid Test kit je hromatografski imunotest sa lateralnim protokom.Komponente test trake sastoje se od: 1) konjugata boje bordo boje koji sadrži mišje anti- pHRP-II antitijelo konjugirano s koloidnim zlatom (pHRP II-zlatni konjugati) i mišje anti-pLDH antitijelo konjugirano s koloidnim zlatom (pLDH-zlatni konjugati),
2) nitrocelulozna membranska traka koja sadrži dvije testne trake (Pan i Pv trake) i kontrolnu traku (C traka).Pan traka je prethodno obložena monoklonskim anti-pLDH antitijelom pomoću kojeg se može detektirati infekcija bilo kojom od četiri vrste plazmodija, Pf traka je prethodno obložena poliklonskim anti-pHRP-II antitijelima za otkrivanje Pf infekcije, a C traka je obložena kozjim antimišjim IgG.
Tokom testa, adekvatna zapremina uzorka krvi se dozira u jažicu za uzorke (S) test kasete, pufer za lizu se dodaje u jažicu pufera (B).Pufer sadrži deterdžent koji lizira crvena krvna zrnca i oslobađa različite plazmodijske antigene, koji migriraju kapilarnim djelovanjem preko trake koja se drži u kaseti.pHRP-II ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate pHRP II-zlato.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim anti-pHRPII antitelima, formirajući Pf traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na Pf.pLDH ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate pLDH zlata.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim antipLDH antitelom, formirajući Pan traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na plazmodijum.U nedostatku Pan trake, može se preporučiti pozitivan rezultat testa za bilo koju od ostala tri plazmodija.
Odsustvo testnih traka (Pan i Pf) sugerira negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja bi trebala pokazati bordo obojenu traku imunokompleksa kozjeg anti-mišjeg IgG / mišjeg IgG (pHRP-II i pLDH-zlatni konjugati) bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od test traka.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
