SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TEST
Visceralna lišmanijaza, ili Kala-azar, je diseminirana infekcija uzrokovana nekoliko podvrsta L. donovani.Svjetska zdravstvena organizacija (WHO) procjenjuje da bolest pogađa oko 12 miliona ljudi u 88 zemalja.Na ljude se prenosi ugrizom pješčanih mušica Phlebotomus, koje dobivaju infekciju hraneći se zaraženim životinjama.Iako je to bolest koja se nalazi u siromašnim zemljama, u južnoj Evropi, postala je vodeća oportunistička infekcija oboljelih od AIDS-a.Identifikacija organizma L. donovani iz krvi, koštane srži, jetre, limfnih čvorova ili slezene daje definitivan način dijagnoze.Serološka detekcija anti-L.Utvrđeno je da je donovani IgM odličan marker za akutnu visceralnu lišmanijazu.Testovi koji se koriste u klinici uključuju ELISA, fluorescentna antitijela ili testove direktne aglutinacije 4-5.Nedavno je korištenje specifičnog proteina L. donovani u testu dramatično poboljšalo osjetljivost i specifičnost.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test je serološki test zasnovan na rekombinantnom proteinu, koji istovremeno otkriva IgG i IgM antitela na L. Donovani.Test daje pouzdan rezultat u roku od 15 minuta bez ikakvih instrumenata.
PRINCIP
Leishmania IgG/IgM brzi test je hromatografski imunotest sa lateralnim protokom.Test kaseta se sastoji od: 1) konjugata boje bordo boje koji sadrži rekombinantni L. donovani antigen konjugiran s koloidnim zlatom (konjugati Leishmania) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) nitrocelulozne membranske trake koja sadrži dvije testne trake (T1 i T2 trake) i kontrolni opseg (C band).T1 traka je prethodno obložena monoklonskim anti-humanim IgM za detekciju anti-L.donovani IgM, T2 traka je prethodno obložena reagensima za detekciju anti-L.donovani IgG, a C traka je prethodno obložena kozjim anti zečjim IgG.
Kada se adekvatna količina uzorka za ispitivanje unese u jažicu za uzorke na kaseti, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kasete.L. donovani IgM ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate Leishmania.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim anti-humanim IgM antitelom, formirajući T1 traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na L. donovani IgM.L. donovani IgG ako je prisutan u uzorku će se vezati za konjugate Leishmania.Imunokompleks se zatim hvata prethodno obloženim reagensima na membrani, formirajući T2 traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na L. donovani IgG.
Odsustvo bilo kojih T traka (T1 i T2) sugerira negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja bi trebala pokazati bordo obojenu traku imunokompleksa konjugata kozjeg anti zečjeg IgG/zečjeg IgG-zlata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od T traka.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
