Detaljan opis
Uobičajene metode za otkrivanje antitijela na AIDS su:
1. Detekcija patogena
Detekcija patogena se uglavnom odnosi na direktnu detekciju virusa ili virusnih gena iz uzoraka domaćina izolacijom i kulturom virusa, elektronskim mikroskopskim posmatranjem morfologije, detekcijom virusnog antigena i određivanjem gena.Prve dvije metode su teške i zahtijevaju posebnu opremu i profesionalne tehničare.Stoga se samo detekcija antigena i RT-PCR (reverzna transkripcija PCR) mogu koristiti za kliničku dijagnozu.
2. Detekcija antitela
Antitijela na HIV u serumu su indirektni pokazatelj HIV infekcije.Prema svom glavnom obimu primjene, postojeće metode detekcije HIV antitijela mogu se podijeliti na skrining test i test potvrde.
3. Reagens za potvrdu
Western blot (WB) je najčešće korištena metoda za potvrdu pozitivnog seruma skrining testa.Zbog relativno dugog perioda prozora, slabe osjetljivosti i visoke cijene, ova metoda je prikladna samo za potvrdni test.Sa poboljšanjem osjetljivosti treće i četvrte generacije HIV dijagnostičkih reagensa, WB postaje sve više nesposoban da ispuni zahtjeve za njegovu upotrebu kao potvrdnog testa.
Drugi tip reagensa za potvrdu skrininga koji je odobrila FDA je imunofluorescentni test (IFA).IFA košta manje od WB, a operacija je relativno jednostavna.Cijeli proces se može završiti u roku od 1-1,5 sati.Glavni nedostatak ove metode je što zahtijeva skupe fluorescentne detektore i iskusne stručnjake za praćenje rezultata evaluacije, a eksperimentalni rezultati se ne mogu dugo sačuvati.Sada FDA preporučuje da negativni ili pozitivni rezultati IFA-e prevladavaju kada se izdaju konačni rezultati davaocima čiji WB nije moguće odrediti, ali se to ne smatra standardom za kvalifikaciju krvi.
4. Skrining test
Skrining test se uglavnom koristi za skrining davalaca krvi, tako da zahtijeva jednostavan rad, nisku cijenu, osjetljivost i specifičnost.Trenutno je glavna metoda skrininga u svijetu još uvijek ELISA, a postoji nekoliko reagenasa za aglutinaciju čestica i brzih ELISA reagensa.
ELISA ima visoku osjetljivost i specifičnost i jednostavna je za rad.Može se primijeniti samo ako je laboratorij opremljen čitačem mikroploča i peračem ploča.Posebno je pogodan za velike laboratorijske pretrage.
Test aglutinacije čestica je još jedna jednostavna, praktična i jeftina metoda detekcije.Rezultati ove metode mogu se procijeniti golim okom, a osjetljivost je vrlo visoka.Posebno je pogodan za zemlje u razvoju ili veliki broj davalaca krvi.Nedostatak je što se moraju koristiti svježi uzorci, a specifičnost je loša.
Klinički antitijela na virus hepatitisa C:
1) 80-90% pacijenata oboljelih od hepatitisa nakon transfuzije krvi je hepatitis C, većina njih je pozitivna.
2) Kod pacijenata sa hepatitisom B, posebno onih koji često koriste krvne proizvode (plazma, puna krv) mogu izazvati koinfekciju virusom hepatitisa C, što može dovesti do hronične bolesti, ciroze jetre ili raka jetre.Stoga, HCV Ab treba otkriti kod pacijenata sa rekurentnim hepatitisom B ili pacijenata sa hroničnim hepatitisom.