SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TEST
Chikungunya je rijetka virusna infekcija koja se prenosi ubodom zaraženog komarca Aedes aegypti.Karakterizira ga osip, groznica i jak bol u zglobovima (artralgije) koji obično traje tri do sedam dana.Ime je izvedeno od riječi Makonde što znači "ono što se savija" u odnosu na pognuti položaj koji je nastao kao rezultat artritisnih simptoma bolesti.Javlja se tokom kišne sezone
u tropskim područjima svijeta, prvenstveno u Africi, jugoistočnoj Aziji, južnoj Indiji i Pakistanu.Simptomi se najčešće klinički ne razlikuju od onih uočenih kod denga groznice.Zaista, u Indiji je prijavljena dvostruka infekcija denga i čikungunije.Za razliku od denga, hemoragijske manifestacije su relativno rijetke i najčešće je bolest samoograničavajuća febrilna bolest.Stoga je veoma važno
za kliničko razlikovanje denga od CHIK infekcije.CHIK se dijagnosticira na osnovu serološke analize i izolacije virusa kod miševa ili kulture tkiva.IgM imunotest je najpraktičnija metoda laboratorijskog testiranja.Chikungunya IgG/IgM brzi test koristi rekombinantne antigene izvedene iz proteina njegove strukture, detektuje IgG/IgM anti-CHIK u pacijentovom serumu ili plazmi u roku od 20 minuta.Test mogu obaviti neobučeni ili
minimalno obučeno osoblje, bez glomazne laboratorijske opreme.
PRINCIP
Brzi test Chikungunya IgG/IgM+NS1 antigena je hromatografski imunotest sa lateralnim protokom.Test kaseta se sastoji od IgG/IgM trake i NS1 trake.
IgG/IgM traka: 1) tamnocrvena konjugatna traka koja sadrži Chikungunya rekombinantne antigene ovojnice konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati denga) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) nitrocelulozna membranska traka koja sadrži dvije testne trake (G i M trake) i kontrolni opseg (C band).G traka je prethodno obložena antitijelom za detekciju IgG anti-Chikungunya virusa, M traka je obložena antitijelom za detekciju IgM anti-Chikungunya virusa, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-zečjim IgG.
NS1 traka:1) bordo obojena konjugirana podloga koja sadrži mišji anti-Chikungunya NS1 antigen konjugiran sa koloidnim zlatom (Chikungunya Ab konjugati), 2) nitrocelulozna membranska traka koja sadrži test traku (T traka) i kontrolnu traku (C traka).T traka je prethodno obložena zečjim anti-Chikungunya NS1 antigenom, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-mišjim IgG antitelom.
IgG/IgM traka: Kada se adekvatna zapremina uzorka za testiranje unese u jažicu za uzorke test kasete, uzorak migrira kapilarnim delovanjem preko kasete.IgG anti-Chikungunya virus ako je prisutan u uzorku će se vezati za Chikungunya konjugate.Imunokompleks se zatim hvata reagensom obloženim G trakom, formirajući G traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na IgG virus Chikungunya i sugerira nedavnu ili ponovljenu infekciju.IgM anti-Chikungunya virus, ako je prisutan u uzorku, će se vezati za Chikungunya konjugate.Imunokompleks se zatim hvata reagensom koji je prethodno obložen na M traku, formirajući M traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na IgM virus Chikungunya i sugerira svježu infekciju.Odsustvo bilo kakvih test traka (G i M) ukazuje na negativan rezultat. Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja bi trebala pokazati bordo obojenu traku imunokompleksa kozjeg anti zečjeg IgG/
zečji IgG-zlatni konjugat bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od T traka.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
NS1 traka: Kada se adekvatna zapremina uzorka za ispitivanje unese u jažicu za uzorke na kaseti, uzorak migrira kapilarnim delovanjem preko test kasete.Chikungunya NS1 Ag ako je prisutan u uzorku će se vezati za Chikungunya Ab konjugate.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim zečjim anti-NS1 antitelom, formirajući T traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na Chikungunya Ag.Odsustvo T trake sugerira negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja treba da pokaže bordo obojenu traku imunokompleksa konjugata kozjeg anti-mišjeg IgG/mišjeg IgG-zlata bez obzira na prisustvo obojene T trake.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
